PeproTech RUO细胞因子
1. 你们的蛋白产品的稳定性如何?
除非在产品说明书中特别注明,我们的所有产品均为冻干粉,在室温条件下非常稳定。尽管如此,我们还是建议您将冻干产品保存在-20oC至-80oC。
对于大多数产品,重悬后在4oC仅能短期保存。如想长期保存,请用含载体蛋白(如0.1% BSA)的溶液稀释已重悬的蛋白,然后分装、冻存于-20oC至-80oC。分装浓度要求不低于1 µg/ml,每管体积要求不小于10µl。
务必注意,请避免反复冻融,因每次冻融均可能引起蛋白的部分变性。因此,我们建议分装的蛋白溶液冻融不要超过1次。
2. PeproTech重组蛋白的内毒素水平如何?
PeproTech大部分无动物成分级别蛋白的内毒素水平均保证低于0.01 ng/µg蛋白,即0.1 EU/µg蛋白。对于大多数非无动物成分级别的蛋白,内毒素水平保证低于0.1 ng/µg蛋白,即1 EU/µg。其实,许多蛋白的实际内毒素含量均低于上面标称的内毒素水平,具体信息请与我们的质量保证(QA)部门(QualityAssurance@PeproTech.com)联系。
3. 为什么我在管中看不到蛋白团块?
与市场上的许多蛋白产品不同,PeproTech的产品中不含任何载体蛋白和其它添加物 (如BSA, HSA和蔗糖等),因此在冻干时微量的蛋白可能会在管内形成一个薄层,有时肉眼不可见。我们建议,在打开管盖前用小离心机快速离心20-30秒,使附着在管盖或管壁上的蛋白团块聚集于管底。尽管可能看不到蛋白团块,但我们的质控程序保证每管中的蛋白含量准确无误。
4. 哪些细胞因子有种属交叉活性?
除少数例外,大多数人细胞因子对小鼠细胞均有活性,很多小鼠细胞因子也可作用于人,但反应的特异性可能低于对应的人细胞因子。干扰素,GM-CSF, IL-3和IL-4等细胞因子的种属特异性很强,与其它种属细胞的交叉反应活性非常弱。相反,成纤维细胞生长因子(FGF)和神经营养素(neurotrophins)等高度保守,在不同动物种属细胞上均呈现良好的生物学活性。
5. ED50和units/mg均用来表示比活性(specific activity),两者之间有什么关联?
ED50的定义是可诱导50%最大反应的细胞因子浓度,而比活性(specific activity)是单位重量蛋白样品中所含的活性单位。比活性单位(Specific Activity Units)只能用于表示蛋白的效能,且仅适用于剂量反应曲线为S形的蛋白。以ng/ml为单位的ED50和以units/mg为单位的比活性之间的换算公式为:
6. 比活性单位(specific activity units)和活性的国际单位(International Units)之间有什么关联?
比活性单位和国际单位(IU)之间没有直接的关联,不能相互换算。
国际单位(IU)是与国际标准品的活性单位(即IU/ng)比对后得出的活性数值,后者是在世界卫生组织(WHO)领导的国际合作研究中确定的。WHO国际标准品由英国国家生物制品检定所(NIBSC)制备和提供。
简单地与国际标准品比对而得出的蛋白活性国际单位(IU)常会出现偏差,原因是每个蛋白厂家所用的活性检测方法很难一致,从而导致与国际标准品比对后得到的国际单位(IU)值相互间不具可比性。想要实现真正的可比性,必须建立标准的活性检测方法,以保证所得出的蛋白活性国际单位(IU)值仅与蛋白的质量有关,而与蛋白的来源无关。
7. PeproTech是怎样得到蛋白活性的国际单位(IU)值的?
在可能的情况下,PeproTech通过将自己的产品与对应的WHO标准品在自已的生物活性测试中进行多次平行比对来得出国际单位(IU)值。多次对比可保证我们能够排除因测试本身的不稳定性(如产品批次,使用方法和测试方案等的变异性)而导致的异常值的出现。经多次比对得出的结果可对我们产品的国际单位(IU)值进行可靠的定量。
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