Cosmobio水凝胶常见问题
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◆ 物理特性
● 当温度高于37℃,甚至高于60℃时,水凝胶将会发生什么变化?
随温度升高水凝胶将会变硬。
● 在0-60℃温度范围内,溶胶/凝胶/水凝胶发生相态变化的温度范围分别是多少?凝胶相可逆变化的温度范围是多少?
0℃-15℃:溶胶
15℃-20℃:溶胶和凝胶的中间体
20℃:相态变化的温度转折点
20℃以上:水凝胶
37℃以上:随温度升高,水凝胶开始变硬。
● 二氧化碳和营养物质是如何供给细胞的?在水凝胶状态下可以溶解到细胞内吗?
可以的,营养物质和二氧化碳在水凝胶中通过多层营养培养基扩散进入细胞。
● 温度为37℃时水凝胶的结构强度是多少?
关于此问题,请参考以下的参考文献:
Yoshioka H et al, A Synthetic Hydrogel with Thermoreversible Galation and Rheological Properties, Journal of Macromolecular Science, Part A: Pure and Applied Chemistry Volume 31, Issue 1, 1994
● 水凝胶上有小孔吗?
水凝胶上没有任何空隙或小孔。
● 凝胶对二氧化碳、氮气和氧气是可渗透的吗?
是的,二氧化碳、氮气和氧气的可以通过凝胶渗透。
● 当Mebiol Gel®处于水凝胶状态时,细胞会被水凝胶包围,那有足够的空间供细胞生长吗?
即使当Mebiol Gel®处于凝胶状态即37℃时,其交联点也是可变的,即会随细胞形态的变化而变化,且没有空隙或间隙。
● 在适当的温度下,Mebiol Gel®从溶胶变成凝胶需要多长时间?
3分钟
● 溶胶-凝胶的转换可以重复多少次?
正常情况下溶胶-凝胶相互转换可重复多次,直到Mebiol Gel®被化学分解。另外,溶胶-凝胶相互转换的次数取决于稀释后的储存温度或氧密度。稀释后若置于4℃储存,Mebiol Gel®可稳定1-2个月的时间,若分装后置于-20℃或-80℃储存,则可稳定更长的时间。
● 多大分子量的营养物质可通过凝胶?营养物质的移动距离与分子量之间有什么相关性呢?
可通过37℃水凝胶扩散的营养物质的最大分子量约为10000‐90000(确切尺寸未知)。如果营养物质的分子量为数千,即1000-9000,在凝胶中扩散是没有问题的。但如果营养物质的分子量超过9000,那在扩散的时就有问题了。营养物质自身的分子量越小,在水凝胶中移动的距离就越长。
● 是否可以提供在37℃时水凝胶的孔隙率数据?
非常抱歉,Cosmobio没有任何关于凝胶孔隙率的数据。但是,以下参考文献的讨论部分有关于“凝胶在不同材料中的扩散速度”的信息,可供参考。
Takao et al., Novel drug delivery system using thermoreversible gelation polymer for malignant glioma Journal of Neuro-Oncology (2005)
一般情况下,当凝胶浓度较低时,凝胶在物料中的“扩散速度”较高。因此当凝胶浓度较低时,凝胶孔隙度较高。但当凝胶浓度较低(如5%)时,不会形成凝胶。
● Mebiol Gel®最小凝胶质量分数(wt%)是多少?
最小的胶浓度大概是7 wt%。Cosmobio推荐加1 g的聚合物至10 g培养基中,这样制出来的胶浓度为9 wt%
◆ Mebiol Gel®和兼容的细胞类型问题
● 当在37℃下培养细胞时,是否可以交换培养基的类型?
当处于37℃时,凝胶不会溶于过量的水。因此,您可以将凝胶上的培养基分层,这样就可以交换分层后的培养基。
● 当细胞在生长过程中接触到水凝胶的边缘时会受到任何阻力吗?
不会。
● Mebiol Gel®是否适用于T细胞或MSC细胞的培养?
Cosmobio没有任何关于在Mebiol Gel®中培养T细胞的数据。关于MSC细胞培养,请参考以下的参考文献:
Yuguo Lei et al., PNAS PLUS E5039E5048 doi: 10.1073/pnas.1309408110
● 请问Mebiol Gel®已经成功培养过哪些类型的细胞?
请参考Cosmobio官网所列的使用Mebiol Gel®培养细胞已经发表的参考文献,链接如下:
http://export.cosmobiousa.com/contents/mebiol_lit_ref.html
● 请问可以使用Mebiol Gel®培养人肺上皮细胞吗?是否可以提供相关的参考数据?
非常抱歉,Cosmobio没有任何关于使用Mebiol Gel®培养人肺上皮细胞的数据。
● Mebiol Gel®是否已经被报道用于培养肠细胞?是否有可支持的参考文献?
非常抱歉,Cosmobio没有任何关于使用Mebiol Gel®培养肠细胞的数据。
● 在溶液状态下,提取细胞时是否会损伤细胞?
不会的。
● Mebiol Gel®是否可被用于流式细胞术?如果可以的话应该使用哪种状态的凝胶?
可以的,当Mebiol Gel®在低温下处于溶胶状态是可以被用于流式细胞术。
● Mebiol Gel®是否可被用于体内实验?如果可以的话,它可以在小鼠体内保留多长时间?
可以的,Mebiol Gel®可以被用于除人以外的其他物种的体内实验。它可以以凝胶的形式在大鼠脑内保留至少28天。更多的信息可以参考以下的参考文献:
T. Ozeki, K. Hashizawa, D. Kaneko, Y. Imai, H. Okada, “Treatment of rat brain tumors using sustained-release of camptothecin from poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres in a thermoreversible hydrogel”, Chem. Pharm. Bull. 58 (9), 1142-1147 (2010)
● Mebiol Gel®对细胞具有毒性吗?如果有的话,对哪些类型的细胞可能会产生毒害作用?
Mebiol Gel®对所有的细胞均是无毒的。
● 有关于使用Mebiol Gel®培养正常或癌变的甲状腺细胞的参考文献吗?
有的,请参考以下已发表文献:
Production of hepatitis C viruses (HCV) by 3-D culture of human hepatocyte cell line・ “Production of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b“ Virology, 351 (2), 381-392 (2006)
◆ 其他问题
● Mebiol Gel®可以室温储存吗?
可以的,粉末状的Mebiol Gel®应置于室温储存。
● Mebiol Gel®的有效期是多久?
Mebiol Gel®的有效期为发货之日起一年。
● Mebiol Gel®一次性未能用完,若将剩余的凝胶置于4℃储存,可储存多长时间?
大约一个月的时间,若要长期储存,请置于-20℃或-80℃。
● Cosmobio可以提供Mebiol Gel®的试用装吗?
非常抱歉,Cosmobio不提供Mebiol Gel®的试用装。
● Cosmobio如何对Mebiol Gel®进行消毒?凝胶里会有一些活体生物吗?
Cosmobio使用EOG对凝胶进行消毒,凝胶里应该不含任何生物。
● 当使用10 mL和50 mL的Mebiol Gel®培养细胞时,应该使用多大规格的培养瓶?
应分别使用T-25和T-75的培养瓶。
● 当重悬Mebiol Gel®时,可以使用质量分数为20%的Mebiol Gel®作为储存原液,而非10%吗?因为我希望在后续的实验中使用其他类型的培养基去进一步稀释。
可以使用20%的Mebiol Gel®代替10%的作为储存原液。但是,请注意20%的高浓度重悬液具有很高的粘度,即使在低温下也具有较低的流动性。
● 说明书中推荐使用10 mL的培养基溶解Mebiol Gel® (MBG-PMW20-1001)。可以使用更大体积的培养基去溶解吗?
一般情况下,Cosmobio推荐使用10 mL的培养基溶解10 mL的Mebiol Gel®。如果您希望溶解50 mL的Mebiol Gel®,则需要加入50 mL的培养基。如果低于这个浓度的Mebiol Gel®溶液,则很难形成凝胶。例如,如果您使用20 mL的培养基去溶解10 mL的Mebiol Gel®,则很难获得凝胶。
● 每瓶中含有多少克的Mebiol Gel®?
10 mL规格的Mebiol Gel®溶液中含有1.0 g的Mebiol Gel®,50 mL的Mebiol Gel®溶液中含有5.0 g的Mebiol Gel®。
● 包装瓶中的粉色药片是什么?
是氧气检测试剂。与Mebiol Gel®一起,作为氧气和水分的吸收剂,但非产品的一部分。
● 可以制备的Mebiol Gel®凝胶浓度最高是多少?
最高浓度大约为15 wt%。如果浓度再高,其黏性会随着浓度的升高而增大,进而导致Mebiol Gel®即使在低温状态下也无法使用,例如在20 wt%浓度下就已经无法使用
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