产品信息
货号:tlrl-pglps
产品包装
- 1 mg 脂多糖
- 1.5 ml无内毒素水
产品描述
LPS-PG是从革兰氏阴性菌Porphyromonas gingivalis(牙龈卟啉单胞菌)分离得到的脂多糖(LPS),LPS是革兰氏阴性菌重要的组成成分,可活化天然免疫系统,LPS-PG是引起牙周疾病的重要毒力因子。
LPS的识别主要是由TLR4调节的,TLR4对LPS-PG的应答依赖于两个关键因子CD14和MD2。
LPS-PG具有一个独特的异质化学结构,可与其他肠道细菌来源的LPS区别开来。LPS-PG对于TLR4缺陷的C3H/HeJ小鼠具有活性,人们普遍认为LPS-PG是TLR2的配体。但是,对于LPS-PG结构和功能的研究发现其是通过TLR4激活细胞的。LPS-PG激活TLR2是由于脂蛋白污染造成的。
质量控制
- 使用HEK-Blue™ TLR4细胞质控TLR4活性
- 使用HEK-Blue™ TLR2细胞控质控其他细菌成分(如脂蛋白)的存在
运输及保存
- 室温运输
- 到货后,需在-20℃保存
- 溶解后的LPS-PG可在4℃保存1个月或者-20℃保存6个月
使用方法
1. 制备储存液 (1 mg/ml)
加入1 ml无内毒素水制备1 mg/ml LPS-PG储存液,混合均匀后分装储存液,冷藏或冷冻保存,进一步稀释使用水进行稀释。
2. 工作浓度
TLR4 activity: 100 ng - 10 µg/ml
TLR2 activity: 10 ng/ml - 10 µg/ml
3. 激活TLR2 & TLR4
分别使用HEK-Blue™ TLR2 细胞和HEK-Blue™ TLR4细胞来检测TLR2和TLR4被LPS-PG激活的情况。HEK-Blue™ TLR细胞稳定表达NF-kB诱导的secreted embryonic alkaline phosphatase (SEAP)并过表达一个TLR基因。
- 在96孔板中加入20µl不同浓度(10 ng - 10 µg/ml)的LPS-PG
- 在96孔板中加入180µl HEK-Blue™ TLR细胞上清
- 在37°C, 5% CO2条件下反应6 - 24 h
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