Spike假型慢病毒颗粒通常用作SARS-CoV-2的模拟物,以研究病毒进入宿主细胞的过程,且无需专门的生物安全实验室(BSL-3)。
InvivoGen提供一系列编码了各种Spike变异株的pLV-Spike质粒,与包装质粒和GFP报告质粒(不提供)共转染293T细胞,这些质粒可以生成Spike假型慢病毒颗粒。假型慢病毒颗粒感染了表达SARS-CoV-2宿主受体的易感细胞系(例如A549-hACE2-TMPRSS2或HEK-Blue™ hACE2-TMPRSS2细胞)后,可以通过GFP表达量进行测定。此方法适合于病毒进入研究,并可用于测试抗体和小分子抑制剂的中和潜力。
使用InvivoGen的pLV-Spike质粒生产SARS-CoV-2 spike (S)假型慢病毒颗粒
在使用假型慢病毒颗粒的实验中,所有受测试的临床衍生单抗均能够抑制Spike B.1.1.7变异株感染(如图A),而B.1.351变异株假型颗粒的感染仅被Imdevimab衍生的单抗阻断(如图B)。
Fig: Spike-pseudotyped particle-based inhibition assay. A549-hACE2-TMPRSS2 cells were cultured in the presence of Anti-CoV2RBD-cas-mIgG2a, Anti-CoV2RBDimd-mIgG2a, Anti-CoV2RBD-bam-mIgG2a or Anti-CoV2RBD-ete-mIgG2a antibodies. Either (A) B.1.1.7 (pLV-SpikeV2) or (B) B.1.351 (pLV-SpikeV3) Spike-pseudotyped GFP lentiviral particles were added to the cells. After 72h, the transduction efficiency (% infectivity) was evalsuated by FACS.
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