免疫印迹试验（Western blot）是利用抗体与抗原间的专一性结合来侦测特定蛋白质的表现，为现代生物化学、细胞生物学、免疫遗传学中常见的实验方法，也被广泛应用于蛋白表达水平的研究、抗体活性检测和早期疾病诊断等多个方面。
免疫印迹试验的技术是结合蛋白质胶体电泳 (gel electrophoresis)的高度解析力、抗体的专一性以及酵素的敏感性，使得科学家们得以在复合物中大海捞针般的寻找蛋白质的存在。一开始以电泳将蛋白质进行大小排列与分离，再利用电场将蛋白质转印到膜上，接着，拥有抗原表位的蛋白质分子就可被抗体（一抗）特异性识别并与之结合。在此基础上，酶或荧光标记的二抗再进一步识别并结合一抗，通过与底物反应显色来观察目标蛋白的表现。
Western blot若利用酵素反应呈色，由于受质的不同，显色的方法可区分为：
一、化学冷光法： Chemiluminescent-based signal detection。
二、直接呈色法：Colormetirc/Chromogen-based signal detection。
三、荧光呈色法：Fluorescent substrate-based signal detection。
发表文献上，又以化学冷光法为最常使用及最方便的呈色方法
化学冷光法(Chemiluminescent-based signal detection)的原理是利用二抗接上辣根过氧化物酶(HRP)，在H2O2存在时，HRP会氧化化学发光物质鲁米诺（lumino，氨基苯二酰一肼）而发出冷光，加上化学增强剂的作用，冷光强度可以增大1,000倍以上。化学冷光法操作简便，只需将两种显色底物等体积混合，再将转印后的膜覆盖在上进行呈色反应，后续讯号侦测可藉由底片感光、显影、定影等冲洗步骤，或是自动化光学检测仪器来得到实验结果。
图一： 化学发光底物作用示意图
GeneTex 开发的Trident HRP substrate (化学发光底物)系列产品，原本仅供公司内实验室使用，因客户询问度高，且经过上万笔实验测试，2016年正式将其产品化，提供给客户使用。
GeneTex Trident HRP substrate系列产品优势：
1.灵敏度高：
优于市面产品(见图), 最高可检测到飞克 (femtogram ;10-15 g)级的蛋白
2.稳定性强：
A、B试剂单独存放28℃, 避光条件下可保存12个月
3.节约时间：
不需做条件优化, 入门新生立即可轻松上手
4.节省样品:
对于样品珍贵或是表达量少的蛋白, 仅需少量蛋白即可侦测
5. 背景值低:杂讯少, 讯号强
产品名 | Trident plus Western HRP Substrate | Trident pico Western HRP Substrate | Trident femto Western HRP Substrate |
货号 | GTX400006 | GTX17435 | GTX14698 |
应用与特色 | 一般日常操作 | 长时间或多次曝光 | 微量蛋白 |
灵敏度 | 皮克picogram (10-10~10-12) | 皮克 picogram (10-12) | 飞克 femtogram (10-15) |
包装大小 | 500 ml | 100 ml | 500 ml | 100 m | 200 ml |
人民币售价 | 2,499 | 999 | 2,999 | 1,899 | 3,299 |
图二：化学发光底物飞克级蛋白测试
图三：化学发光底物皮克级蛋白测试
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