转染是将外源的DNA或者RNA等导入真核细胞,是生物科学研究中经常用到的一种实验手段,可以分为瞬时转染和稳定转染。Mirus有20多年转染试剂生产经验,可以提供广谱的转染试剂,也可以提供针对不同细胞系的转染试剂。本文为大家介绍 MIR 2300 转染金牌产品-----TransIT-LT1转染试剂。
● 产品介绍
Mirus TransIT-LT1转染试剂是一种高效的广谱试剂,可以在许多哺乳动物细胞类型(包括原代细胞)中提供高效的质粒DNA转染。 Mirus TransIT-LT1转染试剂低毒、且兼容多种血清,无需更换培养基。Mirus TransIT-LT1转染试剂既适用于瞬时转染,也适用于稳定转染。可用于干细胞转染,基因表达,病毒生产,shRNA表达和启动子分析等实验。
● 产品特性
● 广谱DNA传递-利用Mirus TransIT-LT1转染试剂可转染各种细胞。
● 低细胞毒性-Mirus TransIT-LT1转染试剂能够维持细胞密度,减少实验偏差。
● 高效传递-Mirus TransIT-LT1转染效率高。
● 适用单质粒或多质粒-Mirus TransIT-LT1适用于病毒生产等应用。
● Mirus TransIT®-LT1转染试剂常见包装
MIR 2304 | TransIT®-LT1 Transfection Reagent | 0.4 ml |
MIR 2300 | TransIT®-LT1 Transfection Reagent | 1 ml |
MIR 2305 | TransIT®-LT1 Transfection Reagent | 5 x 1 ml |
MIR 2306 | TransIT®-LT1 Transfection Reagent | 10 x 1 ml |
● Mirus TransIT-LT1转染试剂数据和文献
(1) 使用TransIT-LT1转染试剂高效转染iCell®心肌细胞。
iCell®心肌细胞在2万个细胞/孔的涂有0.1%的明胶的96孔组织培养板上。在细胞解冻恢复后,细胞用100 ng/孔的pMAXGFP (Lonza)转染,使用TransIT-LT1转染试剂,根据制造商的说明,试剂与DNA的比例为2:1。转染后3天使用Olympus IX71®倒置显微镜拍摄荧光图像。
(2) 比较在多种细胞类型中使用TransIT-LT1试剂和FuGENE®6的荧光素酶表达。
根据行业公认的检测协议,使用3µl的TransIT-LT1或FuGENE®6试剂,在12孔板上每孔用1µg荧光素酶表达载体对所示细胞株进行重复转染。转染后24小时收集细胞并检测荧光素酶活性。
(3) 通过Trans-LT1反向转染人类诱导多能干细胞(iPSCs)的异常转染效率
使用TransIT-LT1转染试剂反向转染1.3 x 106 iPS细胞与ZsGreen表达质粒(Clontech)。使用12µl的TransIT-LT1转染试剂在6孔板上进行反转染,以递送4µg的DNA(试剂:DNA=3:1)。转染48小时后观察细胞,用
Olympus IX71®倒置显微镜在10X镜下成像。图像为(A)相位对比,(B)绿色荧光。转染48小时后,细胞在Accuri®细胞仪上进行检测。直方图(C)显示了未转染的细胞(黑线)与使用TransIT-LT1质粒转染的细胞(绿线)。
转染实验操作流程
转染流程包括培养细胞,制备TransIT-LT1试剂和DNA复合物和将复合物添加到完全生长培养基中的细胞中,具体操作流程和相关问题解决方案可参考说明书。(https://www.mirusbio.com/products/transfection/transit-lt1-transfection-reagent#product:MIR%202300)
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