随着生物治疗药物分子的表征需求迅速增加,包括糖基化在内的翻译后修饰的表征变得越来越重要。安捷伦推出新的糖苷酶产品,帮助客户解决复杂的分析挑战。现已上市四种新的重组糖苷酶:
在通过 LC/FLD 对复杂样品的单个聚糖结构进行表征分析时,许多结构不同的聚糖有可能共流出。这四种外切糖苷酶是简化表征过程的关键工具:
● α(1-2)-甘露糖苷酶对寡糖非还原末端的α(1-2)-连接的甘露糖残基具有高度特异性。可用于测序、酶解至 Man5 结构。
● ß(1-4)-半乳糖苷酶可用于区分 ß(1-4) 和 ß(1-3) 半乳糖连接。
● α(1-3,4,6)-半乳糖苷酶可用于鉴定可能具有潜在免疫原性的含 α-gal 聚糖(Galili 抗原)。
● 唾液酸酶 V 一般用于去唾液酸化,可与唾液酸酶 A(GK80040) 搭配使用,鉴定 α(2-9) 连接的唾液酸。
GK80060、GK80080 和 GK80085 带有 His 标签,客户可通过 IMAC(固定化金属亲和色谱法)轻松去除酶解后多余的酶。
安捷伦还可以为客户提供多种糖苷酶,包括内切糖苷酶和外切糖苷酶。
内切糖苷酶是将低聚糖从糖蛋白及其他底物中释放出来。这些酶可用于在分析前对糖蛋白进行去糖基化,或用于释放N糖以进行标记和分析。
外切糖苷酶是一种糖苷水解酶,可酶解末端残基的糖苷键。这些酶可用于研究游离的多聚糖、糖脂和糖蛋白。针对特定结合位点的外切糖苷酶也可用于低聚糖的测序。
内切糖苷酶 内切糖苷酶可在多聚糖结构内进行裂解。N-糖酶(PNGase F,实际上为一种天冬酰胺酰胺酶)因具备释放大多数完整 N糖的功能而广泛用于研究游离多聚糖及生成去 N-糖基蛋白质。
Agilent | GKE-5002 | AdvanceBio Endoglycosidase H | 内切糖苷酶 H | 30 mU (200 ul) | 裂解高甘露糖型和一些杂合型 N-糖的 N,N'-二乙酰壳聚糖(GlcNAc-GlcNAc) 核心 |
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Agilent | GKE-5003 | PNGase F (native, Elizabethkingia mening | PNGase F | 100 mU (50 ul) | 通过在最内侧的 GlcNAc 和 Asn 之间进行裂解, 释放完 整 N-糖 |
Agilent | GKE-5006A | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | N-聚糖酶 (PNGase F) | 100mU in 40 ul | 通过在最内侧的 GlcNAc 和 Asn 之间进行裂解, 释放完整 N-糖 |
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Agilent | GKE-5006B | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | 200mU in 80 ul |
Agilent | GKE-5006A-05 | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | 5×100mU in 40 ul |
Agilent | GKE-5006B-1 | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | 5×200mU in 80 ul |
Agilent | GKE-5006D | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | 1U in 400ul |
Agilent | GKE-5008 | AdvanceBio Endo F2, recombinant | 内切糖苷酶 F2 | 6 mU (60 ul) | 裂解高甘露糖型和二天线型复合 N-糖的壳二糖 (GlcNAcGlcNAc) 核心 |
Agilent | GKE-5010B | AdvanceBio N-Glycanase-PLUS (PNGase F) | N-聚糖酶-plus | 400mU in 40ul | 通过在最内侧的 GlcNAc 和 Asn 之间进行裂解, 释放完整 N-糖 |
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Agilent | GKE-5010D | AdvanceBio N-Glycanase-PLUS (PNGase F) | 1U in 100ul |
Agilent | GKE-5010B-2 | AdvanceBio N-Glycanase-PLUS (PNGase F) | 5×400mU in 40ul |
Agilent | GKE-5016B | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F, EDTA-F | N-聚糖酶(PNGase F, 不含 EDTA) | 200mU in 80 ul | 通过在最内侧的 GlcNAc 和 Asn 之间进行裂解, 释放完整 N-糖 |
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Agilent | GKE-5016A-05 | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F, EDTA-F | 5×100mU in 40 ul |
Agilent | GKE-5016B-1 | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F, EDTA-F | 5×200mU in 80 ul |
Agilent | GKE-5016D | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F, EDTA-F | 1U in 400 ul |
Agilent | GKE-5020D | AdvanceBio N-Glycanase-ULTRA (PNGase F, | N-聚糖酶-ultra (PNGase F, 不含 EDTA) | 1U in 100ul | 通过在最内侧的 GlcNAc 和 Asn 之间进行裂解, 释放完整 N-糖 |
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Agilent | GKE-5020B-5 | AdvanceBio N-Glycanase-ULTRA (PNGase F, | 5×400mU in 40ul |
Agilent | GKE-5020D-10 | AdvanceBio N-Glycanase-ULTRA (PNGase F, | 10×1U in 100ul |
Agilent | GKE-5011A | AdvanceBio PNGase A (almond), 2 mU | PNGase A | 2mU | 裂解糖肽 N-糖, 包括带有 α(1, 3)-连接的核心岩藻糖的多聚糖, 常见于昆虫和植物多聚糖 |
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Agilent | GKE-5011B | AdvanceBio PNGase A (almond), 10 mU | 10mU |
Agilent | GK80090 | AdvanceBio O-Glycanase | O-聚糖酶 | 50 mU (40 ul) | 从蛋白质中释放未取代的 Ser/Thr 连接的 GalGalNAc |
外切糖苷酶
外切糖苷酶可从多聚糖上裂解暴露或“末端”的单糖残基。常用的外切糖苷酶包括用于去糖基化的半乳糖苷酶,以及用于 游离多聚糖、糖蛋白或细胞去唾液酸化的唾液酸酶(神经氨酸酶)。
Agilent | GK80040 | AdvanceBio Sialidase A, 1 U | 1 U (200 ul) | 唾液酸酶 A | 从低聚糖和糖蛋白中释放 α(2, 3)-、α(2, 6)-、α(2, 8)- 和α(2, 9)-连 接的唾液酸 |
Agilent | GK80045 | AdvanceBio Sialidase A, 51 kDa | 1 U (200 ul) | 唾液酸酶 A-51 | 从低聚糖和糖蛋白中释放 α(2, 3)-、α(2, 6)-、α(2, 8)- 和 α(2, 9)-连 接的唾液酸 |
Agilent | GK80046 | AdvanceBio Sialidase A, 66 kDa | 1 U (200 ul) | 唾液酸酶 A-66 | 从低聚糖和糖蛋白中释放 α(2, 3)-、α(2, 6)-、α(2, 8)- 和 α(2, 9)-连 接的唾液酸 |
Agilent | GK80043 | AdvanceBio Sialidase A, Sampler Kit | 1 ea | 唾液酸酶 A | 从低聚糖和糖蛋白中释放 α(2, 3)-、α(2, 6)-、α(2, 8)- 和α(2, 9)-连 接的唾液酸 |
Agilent | GK80030 | AdvanceBio Sialidase C, 1 U | 1 U (100 ul) | 唾液酸酶 C | 从低聚糖、糖蛋白、复杂碳水化合物中释放 α(2-3, 6)-连接的唾液酸 |
Agilent | GK80021 | AdvanceBio Sialidase S, His-tagged | 3 U | 唾液酸酶 S | 从复杂碳水化合物中释放 α(2-3)-连接的唾液酸 |
Agilent | GK80085 | AdvanceBio α(1-3,4,6)-Galactosidase | 5 U | α(1-3, 4, 6)-半乳糖苷酶 | 从低聚糖中释放非还原末端 α(1-3, 4, 6)-连接的半乳糖 |
Agilent | GKX-5012 | β(1-4,6)-Galactosidase (jack bean) | 5 U lyophilized | β(1-4, 6)-半乳糖苷酶 | 酶水解非还原末端 Galβ(1-6)GlcNAc 和 Gal β(1-4)GlcNAc。 Galβ(1-3)GlcNAc 水解缓慢 |
Agilent | GKX-5013 | β(1-3,4)-Galactosidase (bovine testis) | 0.5 U | β(1-3, 4)-半乳糖苷酶 | 酶水解非还原末端 β(1-3) 和 β(1-4) 连接的半乳糖 |
Agilent | GK80080 | AdvanceBio β(1-4)-Galactosidase, recomb | 200 mU | β(1-4)-半乳糖苷酶 | 从低聚糖和糖蛋白中释放非还原末端 β(1-4)-连接的半乳糖 |
Agilent | GKX-5003 | β-N-Acetylhexosaminidase (jack bean) | 5U in 100ul | β-N-乙酰己糖胺酶 | 释放非还原末端 β(1-2, 3, 4, 6)-连接的 N-乙酰氨基葡萄糖 (GlcNAc) 和 N-乙酰半乳糖胺 (GalNAc) 残基 |
Agilent | GK80050 | AdvanceBio β-N-Acetylhexosaminidase | 1.6 U | β-N-乙酰己糖胺酶 | 酶裂解所有非还原末端 β-连接的 N-乙酰氨基葡萄糖 (GlcNAc) |
Agilent | GKX-5023 | β-(1-2,3,4,6)-Hexosaminidase, Sequencing | 15U in 50ul | β(1-2, 3, 4, 6) N-乙酰己糖胺酶 | 释放非还原末端 β(1-2, 3, 4, 6)-连接的 N-乙酰氨基葡萄糖 (GlcNAc) 和 N-乙酰半乳糖胺 (GalNAc) 残基 |
Agilent | GK80075 | AdvanceBio α(1-2)-Mannosidase (recomb) | 2 mU | α(1-2)-甘露糖苷酶 | 从低聚糖的非还原末端释放 α(1-2)-连接的甘露糖残基 |
Agilent | GKX-5010 | α(1-2,3,6)-Mannosidase (jack bean) | 10 U | α(1-2, 3, 6)-甘露糖苷酶 | 从低聚糖中释放非还原末端 α(1-2, 3, 6)-连接的甘露糖 |
Agilent | GKX-5010-50 | α(1-2,3,6)-Mannosidase (jack bean) | 5 x 10U |
Agilent | GK80060 | AdvanceBio Sialidase V, recombinant 1 U | 1 U | 唾液酸酶 V | 从低聚糖和糖蛋白中释放 α(2, 3)- 和 α(2, 6)-连接的唾液酸。 同时对 α(2, 8)-连接的唾液酸具有一定的活性 |
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