一、选择合适的一抗

• 选择感兴趣特定抗原的抗体

• 考虑组织切片的种类和制备 (固定)

• 考虑抗原修复条件

二、选择合适的二抗和三级检测系统

• 选择HRP或AP酶检测系统

• 考虑检测灵敏度需求

• 考虑一抗种属

• 考虑组织切片种类

三、选择合适的酶底物

• 颜色

• 与其他检测系统试剂兼容性（用于多重染

 色的复染试剂、封片剂和其他底物试剂等）

四、选择核复染染料

• 蓝色、绿色或红色

• 与底物、封片剂的兼容性

五、选择封片剂

• 水溶性 vs 非水溶性

• 与底物和复染试剂的兼容性

六、观察

• 使用显微镜明场视野进行观察

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