1.要测谁？

确认目标蛋白特性

2.谁去测？

抗体种类

a.单克隆：专一性高，灵敏度较多克隆低

b.多克隆：灵敏度高，批次差异较大

c.重组抗体：批次差异小

抗体验证

3.被谁测？

一抗二抗配对

a.兔配兔，鼠配鼠，一抗二抗想配不出错

b.做免疫组化如一抗宿主种属和样本种属来源相同时，需要注意样本内源性IgG是否与二抗结合产生假阳性

呈色方式

a.HRP,AP呈色

b.荧光（多染时抗体种属或亚型不相同，使用的荧光波长不相近）

二抗专一性

a.使用交叉预吸附型二抗提高抗体专一性

4.在哪测？

做什么应用，用什么抗体

a.环境不同，依应用挑抗体

b.做IP实验时，挑选EasyBlot二抗，去除重轻链干扰

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