Bio-rad LYNX Rapid HRP Antibody Conjugation Kit能够使辣根过氧化物酶(HRP)快速标记在抗体或蛋白质上。抗体标记溶液中专利试剂的激活能让HRP定向共价结合在抗体上。该试剂盒可用于在接近中性的pH值的溶液环境中的抗体/蛋白质标记上HRP，并能保证100%抗体回收率的高结合效率。

试剂盒组分：

5 Vials of 1mg LYNX lyophilized HRP mix  

1 Vial LYNX Modifier reagent

1 Vial LYNX Quencher reagent

推荐使用以下缓冲溶液准备抗体:

10-50mM amine-free buffer(例如HEPES、MES、MOPS和磷酸盐)pH范围6.5-8.5或者中等浓度的Tris缓冲液(< 20mM)。如果可能，避免含有nucleophilic成分的缓冲液，如amines 和 thiols(如thiomersal/thimerosal))，因为它们可能会与标记试剂发生反应。EDTA和普通的非缓冲盐和糖对结合效率影响很小。叠氮化钠是HRP的不可逆抑制剂，避免引入叠氮化钠。理想地用于标记的抗体的量应该对应于抗体与HRP之间1∶4和1∶1的摩尔比。考虑到分子量(160,000对40,000)，这意味着对于4mg的辣根过氧化物酶，需要加入1-4mg的抗体。为获得最佳结果，抗体体积应达到1ml，浓度范围为0.5-5.0mg/ml。

标记步骤：

1. 向抗体样品中每10μl抗体添加1μl的Modifier reagent，并轻轻混合。

2. 用移液管将混合的抗体-Modifier reagent样品直接移至LYNX lyophilized HRP mix 中，轻轻上下吹打两次以重悬。

3. 盖好盖子，然后在室温(20-25℃)下孵育3小时，也可以孵育过夜。

4. 孵育后，每10μl抗体添加1μl的Quencher reagent。使用前静置30分钟。

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