ChromaLink生物偶联技术是基于由芳香肼和芳香醛形成稳定的双芳基腙。S-HyNic(琥珀酰亚胺基6-肼基烟酸丙酮腙，SAH)用于在生物分子上掺入芳香肼部分。S-HyNic是一种胺反应试剂，直接将生物分子和表面的氨基转化为HyNic基团。S-4FB(琥珀酰亚胺基4-甲酰苯甲酸酯，SFB)用于将氨基转化为芳香醛(4-甲酰苯甲酰胺(4FB)基团)。向4FB修饰的生物分子或表面添加HyNic修饰的生物分子直接导致缀合物的形成(图1)。双芳基腙键对92O和pH 2.0-10.0稳定。由于抗体在低酸碱度(即< 5.0)下免疫反应的不稳定性，抗体结合的推荐酸碱度为6.0。与基于硫醇的偶联协议不同，基于硫醇的偶联协议需要还原剂，还原剂可以通过切割二硫键损害蛋白质的活性，HyNic-4FB偶联使二硫键保持完整。共轭物的制备不需要氧化剂、还原剂或金属。

图1. ChromaLinkTM technology示意图。

图2.使用Protein-Protein Conjugation Kit的方案图。

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